Введение. Поступление в организм этанола приводит к изменению иммунологической реактивности. Закономерности иммунологических процессов в этих условиях сформулированы в виде 6 иммунологических парадоксов [2]. После свободного доступа крыс к этанолу в течение 1 месяца выявляется две группы животных - крысы, привыкающие к этанолу (КПЭ) и крысы, отвергающие этанол (КОЭ). Иммунологическая реактивность КПЭ к ЭБ снижается незначительно, у КОЭ имеет место существенное угнетение различных форм иммунного ответа [3].
Эффективным инструментом изучения активности биологических соединений является инверсная иммунорегуляция, основанная на образовании или пассивном введении в организм антител к этим соединениям и их рецепторам [1]. Длительное поступление в организм этанола характеризуется значительным усилением образования и повышением содержания в крови опиатных пептидов. Увеличение содержания энкефалинов в крови сопровождается, как правило, усилением иммунного ответа на различные антигены, а повышение концентрации эндорфинов подавляет многие иммунологические реакции организма. Прилипающие к стеклу спленоциты КПЭ и КОЭ выделяют супрессирующие и хелперные цитокины, играющие важную роль в развитии иммуносупрессии и ее коррекции при поступлении в организм этанола. Неясной остается взаимосвязь между иммунорегуляторными сигналами, генерируемыми опиатными пептидами и монокинами в условиях алкогольной интоксикации.
Учитывая это, было изучено влияние антител к рецепторам опиатных пептидов на развитие иммунного ответа у неалкоголизированных КПЭ и КОЭ.
Материалы и методы. Животных иммунизировали эритроцитами барана (ЭБ), которые вводили однократно внутрибрюшинно по 108 клеток. Выраженность иммунного ответа оценивали по количеству в селезенке клеток, образующих антитела к ЭБ, и клеток, образующих розетки С ЭБ через 5 суток после иммунизации.
Неалкоголизированным и получавшим этанол крысам вводили кроличью сыворотку, содержавшую антитела к дельта-рецепторам опиатных пептидов (САРОП), полученную путем иммунизации кроликов препаратом дельта-рецепторов. Титр антител САРОП равнялся 1:2560, антитела полностью разрушались 2-меркаптоэтанолом, то есть относились преимущественно к IgM. САРОП вводили внутривенно трехкратно (с интервалом 4 часа), разовая доза сыворотки равнялась 0,1 или 0,5 мл.
Результаты и их обсуждение. Инъекции 0,1 мл САРОП неалкоголизированным животным (крысам) стимулировали развитие иммунного ответа на ЭБ. САРОП в дозе 0,5 мл не влияла на реакцию, индуцированную ЭБ у интактных животных. Введение 0,1 или 0,5 мл САРОП КОЭ также не влияло на развитие у них иммунного ответа, индуцированного ЭБ. Инъекции САРОП в дозе 0,1 мл КПЭ не влияло на развитие иммунного ответа, а введение САРОП в дозе 0,5 мл супрессировало этот процесс.
В связи с тем, что выраженность иммунной реакции алкоголизированных крыс в значительной степени определяется активностью выделяемых спленоцитами цитокинов, исследовано влияние САРОП на иммуномодулирующее действие фракций супернатантов прилипающих спленоцитов КПЭ. Супернатант клеток, прилипающих к стеклу при 4-10°С, при аллогенном переносе супрессировал, а супернатант клеток, прилипающих при 32-37°С, стимулировал развитие иммунного ответа на ЭБ. Фракционирование супернатантов на сефадексе G-150 показало, что супернатант клеток, прилипающих к стеклу при 4-10°С, содержит иммуносупрессирующий фактор (ИСУФ), выделяющийся в составе фракции белков с молекулярной массой (ММ) 50-60 кД, а супернатант клеток, прилипающих при 32-37°С, иммуностимулирующий фактор (ИСТФ), обнаруживаемый во фракции белков с ММ 10-15кД.
Введение САРОП крысам, получавшим инъекции фракции, содержащей ИСУФ, не влияло на супрессирующий эффект последнего. В отличие от этого, фракция, в состав которой входит ИСТФ, не оказывала стимулирующего влияния на развитие иммунного ответа у животных, получавших инъекции
САРОП.
Результаты проведенных исследований позволяют предположить, что при введении небольших доз САРОП антитела, связываясь с дельта-рецепторами опиатных пептидов, приводят к их интернализации, что вызывает эффект, аналогичный тому, который имеет место при взаимодействии рецепторов со специфическим лигандом. САРОП не оказывает влияния на эффект, вызываемый ИСУФ, и в то же время отменяет эффект ИСТФ. Принимая во внимание разницу в ММ ИСУФ и ИСТФ, есть основания считать, что эффект последнего при алкогольной интоксикации опосредован энкефалинами. Можно предположить, что относительно низкомолекулярный ИСТФ (10-15 кД), в отличие от имеющего большую ММ ИСУФ (превышающую 50 кД), проникает в области 4 желудочка через гематоэнцефалический барьер в мозговые структуры. Такое проникновение имеет место только у алкоголизированных крыс и не происходит у интактных животных. Не исключено, что этанол облегчает проникновение пептидов из крови в мозг. ИСТФ, по-видимому, индуцирует выделение клетками мозга энкефалинов, которые выделяются в кровь, связываются со специфическими для них рецепторами на мембране иммуноцитов и активируют их реакцию на ЭБ. Введение САРОП приводит к блокаде энкефалиновых рецепторов и нарушению указанной последовательности процессов, обусловливающих иммуностимулирующий эффект цитокинов сплено-цитов при алкоголизации.
Не исключено и другое объяснение наблюдавшимся фактам. Можно предположить, что определенные участки иммуностимулирующих цитокинов, гомологичные энкефалинам, связываются с дельта-рецепторами опиатных пептидов и таким путем вызывают иммуномодулирующий эффект. Блокада рецепторов антителами прерывает цепь реакций, опосредующих иммуномодулирующий эффект цитокинов, выделяемых спленоцитами.