Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) является одной из ведущих причин заболеваемости и летальности в современном мире. Летальность от ХОБЛ занимает 4–е место среди всех причин смерти в общей популяции, что составляет около 4% в структуре общей летальности (GOLD, 2003). Особенностью воспаления при хронической обструктивной болезни легких является то, что в результате деятельности фагоцитирующих клеток формируется окислительный стресс, который характеризуется дисбалансом в системах «протеолиз-антипротеолиз» и «оксидант-антиоксиданты». Отсюда одной из основных причин хронически протекающего воспалительного процесса могут явиться дисфункция эффекторных клеток, и, прежде всего, нейтрофильных гранулоцитов. Реагируя на различные факторы, в частности на компоненты табачного дыма, нейтрофилы сегрегируют в окружающую среду факторы с мощным деструктивным и биоцидиным потенциалом (активные метаболиты кислорода, протеолитические ферменты и т.д.), превращаясь, с одной стороны, в действенный инструмент санации очага воспаления, а с другой – в мощное оружие деструкции собственных тканей [1; 2]. Поскольку, в этиологии и патогенезе ХОБЛ значительную роль играет курение, представляет интерес изучение функциональной активности нейтрофилов у курящих. Известно, что ХОБЛ развивается примерно у 15 – 20 % курящих. До настоящего времени нет ответа на вопрос – почему не все курящие заболевают. Известен только один эндогенный фактор этиологически связанный с ХОБЛ – дефицит альфа-1-антитрипсина. Однако установлено, что ХОБЛ обусловленная дефицитом этого антифермента наблюдается не более чем у 1% всех больных. Сравнение функциональной активности клеток-эффекторов (нейтрофилов) у пациентов с ХОБЛ и у длительно курящих, но без признаков болезни, представляет большой интерес. Сопоставление указанных групп позволит определить характеристики нейтрофильного воспаления, которые, при наличие фактора риска, не приводят к развитию ХОБЛ, или наоборот способствуют развитию болезни.
Цель исследования: изучение функциональной активности нейтрофилов индуцированной мокроты, очага асептического воспаления у длительно курящих и при хронической обструктивной болезни легких.
Материалы и методы. Обследовано 26 пациентов с ХОБЛ ΙΙΙ стадии вне обострения (мужчины 47 – 65 лет) и 11 практически здоровых мужчин (40 – 55 лет) индексом курения более 20 пачек/лет. Индекс курящего человека: число выкуриваемых сигарет в сутки «×» стаж курения (годы) деленный на количество сигарет в пачке - 20. Величина, превышающая 20 пачка/лет – критический индекс курения, когда курение является высоким риском в отношении развития ХОБЛ.
Диагностика ХОБЛ проводилась согласно критериям GOLD 2003. Обследование практически здоровых лиц с целью исключения ранних стадий ХОБЛ включало исследование вентиляции легких и ступенчатую субмаксимальную велоэргометрическую пробу с одновременным контролем ЭКГ, АД, сатурации кислорода. Функциональная активность нейтрофилов оценивалась по нескольким параметрам: по их количеству в индуцированной мокроте, хемотаксису при асептическом воспалении, содержанию пероксидазы в нейтрофилах легочного и кожного регионов. Исследование индуцированной мокроты проводили согласно методике изложенной С.Н. Авдеевым, Э.Х. Анаевым, А.Г. Чучалиным (1998). В мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, определяли в процентах количество нейтрофилов, эозинофилов, макрофагов, лимфоцитов, а также фагоцитарную активность нейтрофилов in vivo. Нейтрофилы в асептическом очаге воспаления исследовались с помощью теста «кожное окно» (Маянский Д.Н., Урсов И.Г.,1997). В нейтрофилах индуцированной мокроты и «кожного окна» исследовалась активность пероксидазы (метод Грэхема-Кнолля). Оценка количества пероксидазы в нейтрофилах индуцированной мокроты проводилась методом компьютерной морфометрии, в клетках «кожного окна» - визуальным методом. Статистический анализ проводился с использование непараметрических методов.
Результаты. В индуцированной мокроте наибольшее количество нейтрофилов обнаруживалось при ХОБЛ (80,9 ± 7,2 %), несколько меньшее у лиц с длительным курением - 53,7 ± 7,0% (р < 0,01), что значительно превышало этот показатель здоровых - 27,7 ± 3,3% (р < 0,01). Хемотаксис фагоцитов при искусственном асептическом воспалении («кожное окно») как у пациентов с ХОБЛ, так и у курящих значительно отличался от показателей этой функциональной способности клеток у здоровых. При ХОБЛ в первую фазу воспаления (через 4 -5 часов) у 44% пациентов хемотаксис фагоцитов был значительно снижен – клетки в отпечатках были единичные либо не определялись (у здоровых курящих отмечена высокая хемотаксичная активность – клетки определялись во всез отпечатках. Нарушение клеточного состава в отпечатках выявлено во вторую фазу (через 20 часов) как при ХОБЛ, так и у длительно курящих: процентное соотношение нейтрофилов и макрофагов при ХОБЛ было 54,4 ± 8,8/53,7 ± 3,3, у курящих - 73,4 ± 2,2/26,6 ± 2,3. У здоровых (некурящих) этот показатель составлял – 35/65 (р < 0,05). Пероксидазная активность нейтрофилов в индуцированной мокроте, определяемая методом компьютерной морфометрии по плотности окраски этого фермента в клетках, при ХОБЛ была выше, чем у курящих - 124,5 ± 4,8 ед., 147,0 ± 6,1ед., соответственно (р < 0,05). (При данном методе оценки, меньшая величина, выраженная в относительных единицах, трактуется как большее количество вещества в клетке). При асептическом воспалении пероксидазная активность нейтрофилов при ХОБЛ по сравнению с курящими была значительно снижена. Этот фермент при ХОБЛ III стадии обнаруживался в нейтрофилах кожного окна всего лишь у 10 – 11% больных (у курящих – в 94% случаев). Кроме того, у пациентов с ХОБЛ концентрация пероксидазы была невысокой – средней или низкой и определялась только в 21,7% нейтрофилов. У курящих этот фермент в нейтрофилах был выявлен у 90% обследованных. Обратило внимание, что у курящих, но без признаков ХОБЛ, его содержали все нейтрофилы кожного окна, а в 88% нейтрофилов количество пероксидазы было высоким, что статистически значимо отличалось от аналогичных показателей при ХОБЛ (р < 0,001).
Выводы. У лиц длительно курящих табак (индекс курения выше 20 пачек/лет) в бронхиальном пространстве инициируется нейтрофильная воспалительная реакция, сопоставимая по интенсивности при ХОБЛ. Вместе с тем, пероксидазная активность нейтрофилов выделенных из слизистой бронхов у длительно курящих, но без признаков ХОБЛ, менее выражена, чем у пациентов с ХОБЛ. У курящих в очаге искусственного асептического воспалении в коже активность пероксидазы в нейтрофилах чрезвычайно высока. Таким образом, у длительно курящих, но без признаков ХОБЛ, нейтрофилы характеризуются высокой потенциальной активностью пероксидазной системы, определяющей деструктивные и биоцидиные свойства этих клеток, но которая не реализуется в нейтрофилах бронхиального пространства. Можно предположить, что у лиц с критическим индексом курения, но без признаков ХОБЛ имеются механизмы, ограничивающие чрезмерную активацию пероксидазной системы нейтрофилов бронхиального пространства.

Список литературы:
1. Авдеев С.Н. Терапия обострений хронической обструктивной болезни легких //РМЖ. - 2003– Т11. - №4. – с.23-24.
2. Шмелев Б.И. Хроническая обструктивная болезнь легких. М., 2003. – 189с.