Прогноз острых лейкозов (OJI) у детей зависит от своевременной диагностики. Назначение адекватной терапии конкретному пациенту возможно только с учетом группы риска» которая формируется в зависимости от формы ОЛ. Дифференциация различных вариантов ОЛ в настоящее время воз можно методом иммунофенотипирования. [1]
С помощью моноклональных антител распознаются поверхностные и внутриклеточные структуры и поэтому сейчас все острые лимфобластные лейкозы (Akute Lymphatische Leukaemie (ALL) можно подразделить на Т - иВ - клеточные. Экспрессия антител клеткой в процессе своего развития не одинакова поэтому при помощи метода проточной цитометрии возможно различение и сопоставление стадий созревания Т или В клеток. Примерно 80% всех ALL характеризуются как ранние npe-B-ALL, они экспрессируют common-ALL - антиген и другие ранние маркеры В-клеточного ряда. И только 2% всех случаев составляют зрелые В-клеточные ALL. Примерно 10-15% случаев всех ALL характеризуются различными степенями зрелости Т-клеток, T-ALL. Остальные 5-8% -результат лейкемической трансформации детерминантных стволовых клеток [2].
Сложности составляет диагностика острых миелобластных лейкозов (Akute Myeloblastische Leukaemie (AML)), которые наряду с патологической экспрессией антител, экспрессируют нормальные клеточные маркеры. У детей AML встречается только в 15-20% случаях [3,4].С помощью проточной цитометрии можно установить морфологический росток и проводить текущий контроль, хотя в диагностике AML метод иммунофенотипирования имеет вспомогательное значение.
В методике проточной цитометрии клетки цельной крови окрашивают специфическими по CD-системе флуоресцентными aHTH-CD-антителами, затем их помещают в проточный цитометр лкоторый измеряет интенсивность свечения каждой клетки в разных областях. Цитометр может определить до пяти различных цветов флуорохрома.
С целью внедрения метода иммунофенотипирования в Пермской областной детской клинической больнице была проведена подготовка специалиста по программе обмена врачей и студентов в университете им. Г. Гейне в г. Дюссельдорф (Германия). Являясь студенткой пятого курса Пермской Медицинской Государственной Академии, прошла обучение методам иммунологической диагностики в детской онкогематологии.
В течение года пребывания в Германии наблюдала за группой детей больных ОД, делая им еженедельное исследование иммунного статуса. Оказалось, что у детей в 70% случаев после полной иммуносупрессии ( на фоне лечения цитостатиками и aHTH-CD20-TepanHH ) и после трансплантации костного мозга реакции отторжения трансплантата (GvHD-infektion) не было .В случае неполной супрессии - возникала GvHD-infektion. Начальную стадию GvHD-infektion выявляли по высоте активности Т-клеток, то есть их экспрессии HLA-DR и CD3 антител в равной степени.
Метод проточной цитометрии внедрен в Пермской областной клинической больнице в ноябре 2002 года Иммунофенотипирование проведено семи детям с возрасте 1 мес-13 лет с впервые выявленным ОЯ Обнаружено два случая common-ALL и пять случаев AML (3+миелобластаых) и 2 случая промиелоцитарных ОЛ. Всем детям назначена адекватная терапия в соответствии с вариантом лейкоза
Определение иммунофенотипа клетки используется для динамического контроля и дифференциального диагноза при миелодиспластическом синдроме, апластических анемиях и других иммунодефицитных состояниях.
В перспективе планируется расширить спектр применения иммунофенотипирования для диагностики других гемобластозов: лимфогранулематоза и неходжкинских лимфом у детей.