Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам Международной 65-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2006 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М.

Посмотреть титульный лист сборника

Скачать сборник целиком (1,5 мб)

 Сахарный диабет (СД) является одной из самых актуальных проблем современного здравоохранения. По данным Международного комитета ВОЗ (1993), число больных СД значительно возросло и составляет более 3 % населения земного шара, а в возрастной группе старше 60 лет достигает 7–9 %. Благодаря инсулинотерапии летальность от диабетической комы уменьшилось с 47,7 до 1,2 %. В то же время летальность от сосудистых осложнений возросла с 27,1 до 77 % [2]. Большая социальная значимость СД состоит в том, что он приводит к ранней инвалидизации и летальности, которая чаще всего обусловлена наличием поздних сосудистых осложнений диабета: микро- и макроангиопатий. Так, более 40 % всех ампутаций нижних конечностей, не обусловленных травмой, проводится в связи с синдромом диабетической стопы, объединяющим патологические изменения периферической нервной системы, артериального и микроциркуляторного русла, представляющие непосредственную угрозу развития язвенно-некротических процессов и гангрены [1]. 

В качестве параметра, характеризующего влияние патологического процесса, нами использовалось морфофункциональное состояние тканевых базофилов (ТБ). Показано, что ТБ играют важную роль в регуляции микроциркуляции, трофики тканей, в размножении, миграции и функции клеток, и поэтому рассматриваются как регуляторы тканевого гомеостаза малого радиуса действия и в целом как своеобразный индикатор напряженности органа или ткани, чутко реагирующий на изменение внутренней среды организма [3].

Цель работы: изучить изменения морфофункционального состояния дермальных базофилов и их микроокружения при экспериментальном сахарном диабете.

Материал и методы. Исследование проводилось на базе кафедры микробиологии и вирусологии Сибирского государственного медицинского университета. Опыты выполнялись на 20 взрослых беспородных крысах-самцах массой 180–220 г, разделенных на 4 группы. Содержание животных осуществлялось в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей. Для моделирования аллоксанового диабета у животных использовали 4 % раствор аллоксангидрата («Лахема-хемапол», Чехословакия), который вводили в дозе 100 мг/кг четырех кратно один раз в день в течение четырех дней, внутрибрюшинно, и через неделю после этого однократно в дозе 200 мг/кг. Спустя 7 суток после введения 4 % раствора аллоксангидрата у крыс подтверждалось развитие гипергликемии. Забор крови производили из хвостовой вены. Для исследования отбирались животные с концентрацией глюкозы в крови свыше 10 ммоль/л. При такой форме введения препарата развивается тяжелая форма сахарного диабета в течение 10 дней и исключается возможность спонтанного восстановления клеток поджелудочной железы.

Материал для исследования забирали на 30-е, 45-е и 60-е сутки после введения 4 % раствора аллоксангидрата, после подтверждения гипергликемии у крыс. Животных забивали путем декапитации, согласно методическим рекомендациям МЗ СССР «Эвтаназия экспериментальных животных» [1985]. Время от момента забоя животного до изъятия материала – 1–2 мин.

Исследуемым материалом являлись гистологические препараты кожи крыс, взятой с левой наружной области задней лапы, фиксированные в жидкости Карнуа и  окрашенные 0,1 % раствором толуидинового синего. Гистологические препараты изучали под микроскопом (х400). В срезах подсчитывали общее количество дермальных базофилов в 30 полях зрения. Вычисляли индекс активности ТБ (отношение числа дегранулированных базофилов к количеству всех интактных) и индекс созревания (отношение количества молодых к числу зрелых форм базофилов).

Статистическую обработку данных проводили с помощью непараметрического U-критерия Манна–Уитни и определяли значимость различий (p). Разницу двух сравниваемых величин (контрольных и исследуемых значений) считали достоверной при p<0,05.

Результаты и обсуждение. При количественном анализе дермальных базофилов у крыс с экспериментальным аллоксановым диабетом выявлены достоверные различия в их содержании по сравнению с группой интактных животных (табл.). Установлено, что после введения крысам 4 % раствора аллоксангидрата содержание ТБ в коже уменьшается (ниже 50 %) и остается пониженным в течение всего эксперимента. Значения индекса созревания дермальных базофилов у крыс с аллоксановым диабетом были существенно снижены относительно нормального уровня (на 45–50 %) в течение всего опыта.

Таблица

Содержание дермальных базофилов в организме диабетических крыс и их морфофункциональная характеристика

Таким образом, ТБ реагировали на экспериментальный аллоксановый диабет изменением количественного содержания, морфологических и функциональных признаков. Состояние ТБ в группе диабетических крыс характеризовалось стойким угнетением всех показателей морфофункционального статуса. Такая картина морфофункционального состояния ТБ в значительной степени опосредуется дефицитом инсулина в организме экспериментальных животных. Так, гипергликемия, тканевая гипоксия, накопление конечных продуктов гликозилирования белков приводят к активации процессов перекисного окисления липидов, которая, в свою очередь, ведет к накоплению токсических продуктов и дестабилизации цитоплазматических мембран, нарушая тем самым их функцию и межклеточные взаимодействия [1]. Угнетение показателей морфофункционального статуса наблюдалось на фоне незначительного повышения функциональной активности в начальные сроки после инъекции аллоксана, что может быть обусловлено высокой чувствительностью ТБ к изменениям внутренней среды.

Список литературы:

1.           Балаболкин, М. И. Патогенез ангиопатий при сахарном диабете / М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова // Сахарный диабет. – 1999. – № 1. – С. 7–8.

2.      Гришина, Т. И. Иммунокоррекции полиоксидонием в комплексном лечении гнойно-некротических осложнений синдрома диабетической стопы / Т. И. Гришина // Иммунология. – 2000. – № 5. – С. 32–34.