ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы IX
конгресса молодых ученых и специалистов (Томск, 28-29 мая 2010 г) / Под ред. Л.М.
Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2010. – 113 с.
Посмотреть обложку сборника
Скачать сборник целиком
Введение. Проблема лечения воспалительных заболеваний роговицы является одной из актуальных в современной офтальмологии [1 ]. Отсутствие в роговице сосудов ограничивает проникновение в инфильтрат лекарственных веществ при системном введении. Обоснованным становится использование препаратов в каплях и мазях, так как осмотический тип питания роговицы определяет ее высокую проницаемость, однако быстрый распад лекарственных препаратов с утратой фармакологической активности обуславливает к многократным применение их для поддержания необходимой концентрации, что является неудобным для пациента и нередко приводит к аллергическим реакциям [3]. Недостаточная эффективность традиционных методов консервативного лечения обусловливает поиск и разработку новых способов лечения заболеваний роговицы.
Цель исследования - в эксперименте in vivo изучить эффективность интрастромального ведения ау-тологичных мононуклеаров крови в лечении индуцированного повреждения роговицы. Материалы и методы. Выполнена серия экспериментов на 20 половозрелых кроликах породы Шиншилла массой 2,5-4,0 кг. В условиях операционной каждому животному выполнялась тотальная де-эпителизация роговицы и механическое повреждение стромы и эндотелия роговой оболочки одного из глаз. В зависимости от способа лечения животные были разделены на 2 группы: основную (n=10) -животным, наряду с инстилляциями раствора ципролета 6 р. и корнерегеля 3 р. в день, в строму роговицы вводили аутологичные мононуклеары крови. Мононуклеары, взятые из крови животного, выделяли методом фракционирования в градиенте плотности. [2]. В ходе эксперимента процедуру выполняли от 1 до 3 раз с интервалом 3-4 дня в зависимости от степени тяжести заболевания и динамики клинической картины; группу сравнения (n=10) - животным выполнялись инстилляции ципролета 6 р., корнерегеля 3 р. в день. Общая продолжительность эксперимента составила 21 сутки. В ходе эксперимента проводились наружный осмотр, биомикроскопия, флюоресцентная проба, фоторегистрация. Забор материала производился на 3, 5, 7, 14, 21 сутки от начала эксперимента. Из каждой группы выводили по 2 животных с последующей энуклеацией обоих глаз. Полученный материал фиксировали для световой микроскопии.
Результаты. На 3 сутки у животных основной группы - эпителий роговицы представлен 5-6 слоями плоских клеток. Основное вещество было представлено пучками коллагеновых волокон, расположенными несколько неупорядоченно. В строме отмечалась диффузная мононуклеарная инфильтрация. У животных группы сравнения - эпителий роговицы представлен гидропически дистрофическими эпителиоцитами. Подлежащая строма отечна, коллагеновые волокна располагались в виде рыхлой сети. В области лимба отмечалась густая инфильтрация с большим количеством полиморфноядер-ных лейкоцитов. Эндотелий роговицы был десквамирован.
На 5-7 сутки у животных основной группы - эпителий роговицы представлен 5-6 слоями клеток. Ба-зальные эпителиоциты активно пролиферировали. В строме роговицы ход коллагеновых пучков становился упорядоченным. В области лимба обнаруживалось диффузное скопление мононуклеарных клеток и единичные расширенные сосуды краевой петлистой сети. Эндотелий роговицы сохранялся практически на всем протяжении. У животных группы сравнения - клетки эпителия роговицы располагались в 6-7 слоев и имели кубическую форму. На поверхности эпителия обнаруживались очаговые отложения фибрина. В строме роговицы наблюдалась диффузная лимфомоноцитарная инфильтрация и тонкостенные новообразованные сосуды. Эндотелий роговицы представлял собой 1 ряд плоских клеток, местами был слущен.
На 14-е сутки у животных основной группы - эпителий роговицы содержал 4-5 слоев плоских клеток, эпителиоциты базального слоя имели кубическую форму. Передняя пограничная мембрана определялась на всем протяжении. Строма роговицы содержала упорядоченно расположенные пучки коллаге-новых волокон и тонкостенные сосуды. Задняя пограничная мембрана сохраняла толщину, наблюдаемую в предыдущие сроки. У животных группы сравнения - эпителий роговицы состоял из 4-5 слоев плоских клеток, базальные эпителиоциты имели высокопризматическую форму и гиперхром-ные ядра. Пограничная мембрана была гомогенной, несколько утолщенной. В задней 1/3 собственное вещество роговицы было гомогенным, дифференцировать волокнистые структуры не представлялось возможным вследствие деструкции основного вещества. В области лимба в строме роговицы обнаруживались новообразованные сосуды, некоторые из которых имели стенку выстланную гладкими миоцитами.
На 21 -е сутки у животных основной группы эпителий роговицы имел нормальное строение. Передняя и задняя пограничные мембраны определялись на всем протяжении. Строма роговицы имела нормальное строение и была представлена упорядоченно расположенными коллагеновыми волокнами. У животных группы сравнения эпителий роговицы имел нормальное строение. Передняя пограничная мембрана определялась на всем протяжении, однако была несколько утолщенной. На уровне 2/3 стромы отмечалось активное образование коллагеновых волокон, в задней 1/3 сохранялись отек и гомогенизация.
Заключение. Интрастромальное введение аутологичных мононуклеаров крови при повреждениях роговицы стимулирует репаративную регенерацию, препятствуя избыточному рубцеванию и неова-скуляризации роговой оболочки.
Список литературы:
1. Либман Е.С., Шахова Е.В. Слепота и инвалидность вследствие патологии органа зрения в России // Вестн. офтальмол. - 2006. - №1. - С. 35-37.
2. Новицкий В.В., Шахов В.П. Введение в методы культуры клеток, биоинженерия органов и тканей. - Томск: STT, 2004. - 386 с.
3. Поромова И.Ю., Мисюн Ф.А. Современные направления в лечении язвенных кератоувеитов // Офтальмохирургия и терапия - Т.5. - №1. - С. 8-13.
|