|
ГОУВПО СибГМУРосздрава (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике "Науки о человеке": материалы IX конгресса молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М.
Огородовой, Л.В. Капилевича. – Томск: СибГМУ. – 2008. – 135 с.
Посмотреть обложку сборника
Скачать сборник целиком
Изъязвления роговицы составляют наибольший удельный вес среди заболеваний, приводящих к роговичной слепоте. Эпидемиологические исследования последних лет выявили отрицательные тенденции в динамике роста численности язв роговицы, что связано с увеличением количества экзогенных факторов риска. Наблюдаются тенденции и в изменении характера возбудителей бактериальных язв роговицы. Кроме того, очевидны серьезные негативные последствия традиционной антибиотикотерапии: развитие дисбактериоза и присоединение грибковой инфекции, рост числа антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов, развитие аллергических реакций.
Цель - в эксперименте изучить эффективность местного применения аутологичных моно-нуклеаров крови при лечении гнойной язвы роговицы.
Материалы и методы. Выполнена серия экспериментов на 48 половозрелых крысах-самцах породы Wistar массой 250 г. Язву роговицы моделировали посредством одномоментного интрастромального введения монокультуры Staph. aureus (штамм 209 P) из расчета 2 млрд. микробных тел на 1,0 мл в сочетании с полной деэпителизацией роговицы. Лечение начинали на 3-и сут. после инфицирования роговицы. В зависимости от способа лечения животные были разделены на 2 группы: основную (n=24) - животным данной группы, наряду с инстилляциями раствора ципролета 6 р. в д., проводили инстилляции аутологичных моно-нуклеаров крови с аналогичной частотой. В ходе лечения инстилляции мононуклеаров повторяли 4 раза с интервалом 3 дня. Мононуклеары, взятые из крови экспериментального животного, выделяли методом фракционирования в градиенте плотности; контрольную (n=24) -животным выполнялись только инстилляции раствора ципролета с частотой 6 р. в д.
Общая продолжительность экспериментов составила 19 суток. Забор материала производили на 3, 6, 9, 12, 15 и 19 сутки от начала эксперимента.
Результаты. Средний срок купирования воспаления в основной группе по сравнению с контролем сократился в 1,6 раза, составив 9,1+/-0,17 суток и 15,4+/-0,18 соответственно. Рассасывание инфильтрации и отека стромы роговицы у животных основной группы ускорилось на 43%, завершившись к 9,4+/-0,16 сут., в то время как в контрольной группе данный процесс завершился лишь к 16,5+/-0,18 сут. Рассасывание гипопиона в основной группе ускорилось в 1,94 раза. В более ранние сроки у животных основной группы по сравнению с контролем началась эпителизация роговицы (6,8+/-0,28 сутки и 8,7+/-0,25 сутки соответственно). Применение аутологичных мононуклеаров крови в сочетанном с инстилляциями раствора ципролета лечении язв роговицы позволило в 3,9 раза сократить число осложнений заболевания. У животных основной группы в 12,5% наблюдалось развитие десцеметоцеле. В контрольной группе, помимо десцеметоцеле в 18,7%, в 14,6% отмечалась перфорация роговицы и в 14,6% - эндофтальмит, завершившиеся в исходе субатрофией глазного яблока.
В ходе морфологических исследований получены следующие результаты. На 3-и сутки после инфицирования роговицы и развития экссудативно-деструктивного воспаления у животных обеих групп до начала лечения на роговице обнаруживался обширный участок воспалительной инфильтрации с явлениями некроза в центре толщиной 0,37+/-0,003 мм. Пери-фокально отмечался выраженный отек стромы роговицы. Воспалительная инфильтрация была представлена полиморфноядерными лейкоцитами (ПМЛ) (92+/-1,0 клеток в поле зрения).
На 6-е сутки у животных основной группы отмечалось уменьшение площади воспалительной инфильтрации и перифокального отека роговицы. При этом отсутствовали явления некроза стромы. Клеточный состав инфильтрата был представлен ПМЛ (49,5+/-2,0) и моно-нуклеарными фагоцитами (7,3+0-1,5). У животных контрольной группы на фоне воспалительной инфильтрации роговицы в центре сохранялся участок некроза толщиной 0,27+/-0,04 мм. Среди клеток инфильтрата преобладали ПМЛ (67,4+/-2,0), однако обнаруживались в небольшом количестве и мононуклеарные фагоциты (3,2+0+/-1,0).
На 9-12-е сутки в основной группе эпителий полностью покрывал поверхность роговицы. В зоне остаточной воспалительной инфильтрации наблюдалось качественное изменение клеточного состава. При этом преобладающими элементами были мононуклеарные фагоциты (9,5+/-0,2) и фибробласты (10,1+/-0,1). Сохранялись остаточные явления отека стромы. Обнаруживалось небольшое количество коллагеновых волокон. У животных контрольной группы сохранялась воспалительная инфильтрация стромы роговицы без явлений некроза. Среди клеток преобладали полинуклеарные (29+/-0,1) и мононуклеарные (7,5+/-0,2) фагоциты. Наблюдалась активная эпителизация роговицы, представленная в центральных отделах 3-4 слоями эпителиальных клеток.
На 15-19 стуки у животных основной группы отмечалась полная эпителизация роговицы. В зоне воспаления обнаруживались компактно расположенные коллагеновые волокна. Одновременно уменьшалось число мононуклеарных фагоцитов - до 4,7+/-0,1 и фибробластов - до 6,7+/-0,1. В контрольной группе отмечалась полная эпителизация поверхности роговицы. Наблюдалось активное образование коллагеновых волокон. В клеточном ансамбле преобладали фибробласты (10,5+0-0,2) и мононуклеарные фагоциты (6,4+/-0,1). Количество ПМЛ сокращалось до 14,7+/-0,2 клеток.
Таким образом, на фоне применения инстилляций аутологичных мононуклеаров крови отмечается достоверно быстрое купирование экссудативно-деструктивной реакции и переход воспаления в фазу репарации, а также сокращение числа осложнений.
|
