Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Наиболее частыми причинами обострений хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) являются инфекция респираторного трак¬та и атмосферные поллютанты, однако причину тре¬ти обострений идентифицировать не удается. Один из важнейших элементов ХОБЛ – воспаление, которое играет первичную роль в формировании всего комплекса патологических изменений. Бактериальная контаминация бронхиального дерева – стабильный компонент хронического воспаления при ХОБЛ. Трансформация контаминации в инфекционный процесс наиболее частая причина обострений ХОБЛ. Биомаркерами воспаления при ХОБЛ являются нейтрофилы. Преимущественно они участвуют в формировании местного дефицита антипротеаз, развитии оксидативного стресса, играют ключевую роль в цепи процессов, характерных для воспаления, ведущего в конечном итоге к необратимым морфологическим изменениям. Нейтрофилы сегрегируют в окружающую среду флогогенные факторы с мощным деструктивным и биоцидным потенциалом (активные метаболиты кислорода, протеолитические ферменты и т.д.), превращаясь, с одной стороны, в действенный инструмент санации очага воспаления, а с другой — в мощное оружие деструкции собственных тканей.
В настоящее время неясна функция клеток-эффекторов нейтрофилов при обострении болезни. Ответ на этот вопрос чрезвычайно важен, по крайней мере, вследствие возможного развития двух вариантов событий. Первый – инфекционный процесс инициируется из-за снижения биоцидности нейтрофилов. Лечебная программа тогда должна включать средства стимулирующие функцию этих клеток. Второй вариант – обострение обусловлено как инфекционным процессом, так и чрезмерным повышением деструктивного потенциала нейтрофилов (активацией протеолитических ферментов и активных метаболитов кислорода). В этом случае в лечении необходимо использовать противовоспалительную терапию. (Не обсуждается необходимость применения антибиотиков при инфекционном обострении ХОБЛ как регламентированный компонент терапии).
Учитывая вышеизложенное, целью исследования являлось: изучение динамики функциональной активности нейтрофилов при обострении хронической обструктивной болезни легких.
Материалы и методы. Обследовано 26 пациентов с ХОБЛ ΙΙΙ стадии в период обострения (мужчины 47 – 65 лет). Исследование проводили при поступлении (до назначения глюкокортикостероидов) и на 14 – 16 день лечения. Диагностика ХОБЛ осуществлялась согласно критериям GOLD 2003. Функциональная активность нейтрофилов оценивалась по их количеству в индуцированной мокроте (ИМ), хемотаксису при асептическом воспалении, содержанию пероксидазы в нейтрофилах легочного и кожного регионов, количеству катионного протеина в нейтрофилах индуцированной мокроты, фагоцитарной активности нейтрофилов ИМ in vivo. Исследование индуцированной мокроты проводили согласно методике изложенной С.Н. Авдеевым, Э.Х. Анаевым, А.Г. Чучалиным (1998). В мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, определяли в процентах количество нейтрофилов, эозинофилов, макрофагов, лимфоцитов, а также фагоцитарную активность нейтрофилов in vivo. Нейтрофилы в асептическом очаге воспаления исследовались с помощью теста «кожное окно» (Маянский Д.Н., Урсов И.Г., 1997). В нейтрофилах индуцированной мокроты и «кожного окна» исследовалась активность пероксидазы (метод Грэхема-Кнолля). Оценка количества пероксидазы в нейтрофилах индуцированной мокроты проводилась методом компьютерной морфометрии, в клетках «кожного окна» - визуальным методом. Для цитохимического исследования с целью определения содержания в эозинофилах внутриклеточных катионных протеинов индуцированной мокроты мазки окрашивали по методу Е.В. Пигаревского, В.Н. Мезинга, (1981).Статистический анализ проводился с использование непараметрических методов.
Результаты. Количество нейтрофилов в ИМ при обострении и его затухании существенно не отличалось (85,1 ± 2,5% и 80,9 ± 7,2), соответственно, что значительно превышало их количество у здоровых - 27,7 ± 3,3 (р < 0,01). Фагоцитарная активность in vivo была в первые дни обострения 25,5 ± 4,7, в последующем – несколько снижалась - 17,1± 4,1. Пероксидазная активность нейтрофилов в индуцированной мокроте, определяемая методом компьютерной морфометрии по плотности окраски этого фермента в клетках, составила при обострении ХОБЛ 129,7 ± 3,4 ед. в дальнейшем, к 14 – 16 дню, незначительно увеличилась 124,5 ± 4,8. (При данном методе оценки, меньшая величина, выраженная в относительных единицах, трактуется как большее количество вещества в клетке). Однако за весь период наблюдения количество пероксидазы у пациентов с ХОБЛ было выше, чем у практически здоровых - 147,0 ± 4, 1ед (р < 0,01). Статистически значимая динамика наблюдалась в отношении катионных протеинов, содержащихся в нейтрофилах. Если при поступлении эта величина была 111,9 ± 1,6 ед., то на 14 – 16 день – 95,04 ± 3,2ед. (р < 0,01), то есть при затухании обострения в клетках увеличивалось количество катионных протеинов. Хемотаксис нейтрофилов в кожном окне за весь период наблюдения существенно не менялся, но через 20 часов не наблюдалось нормальной смены фаз, характерной для здоровых – хемотаксис нейтрофилов продолжал оставаться достаточно высоким. Соотношение нейтрофилы/макрофаги при ХОБЛ в этот период было 54/53, у здоровых – 35/65 (р < 0,05). Пероксидазная активность в нейтрофилах региона асептического воспаления была очень низкой и не претерпевала значимой динамики за более чем двухнедельный период наблюдения. Пероксидаза обнаруживалась только у 10 – 11% пациентов с ХОБЛ, причем 78 – 80 % клеток не содержали этого фермента, а его количество визуально характеризовалось как «среднее» и «малое».
Выводы. Обострение ХОБЛ ΙΙΙ стадии характеризуется снижением биоцидной активности нейтрофилов различной локализации, как бронхиального пространства, так и региона асептического воспаления, что проявляется уменьшением синтеза катионных протеинов, снижением пероксидазной активности.

Список литературы:
1. Авдеев С.Н., Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Применение метода индуцированной мокроты для оценки интенсивности воспаления дыхательных путей //Пульмонология. – 1998.- №2.-С.81-87.
2. Пигаревский Е.В., Мезинг Ю.В. Определение катионных белков в гранулоцитах крови //Лаб. дело.-1982.-№3.-С.40-42.