Актуальность исследования
В настоящее время существует новое направление в лечении рубцовых дефектов кожи -использование культивированных клеток кожи человека. Многолетние исследования регенераторных процессов, выполненные в Институте хирургии им. А. В. Вишневского РАМН показали, что одной из наиболее биологически активных клеток грануляционной ткани является фибробласт. Фибробласты - основные клетки соединительной ткани. Главная функция фибробластов дермы - участие в метаболизме межклеточного вещества. Состояние и функция основных внеклеточных компонентов соединительной ткани, коллагеновых, эластических, ретикулярных волокон и межклеточного матрикса зависят от функциональной активности фибробластов. Фибробласты кожи синтезируют и выделяют в окружающую среду большое количество биологически активных веществ, среди которых можно выделить различные факторы роста: KGF-фактор роста кератиноцитов, EGF-фактор роста эпидермиса, регулирует миграцию и пролиферацию эпидермальных клеток, FGF- фактор роста фибробластов, стимулирует рост всех типов клеток и продукцию внеклеточного матрикса, TGF-трансформирующий фактор роста, участвует в образовании новых кровеносных сосудов. Фибробласты выделяют также компоненты внеклеточного матрикса (гликозаминогликаны; это гиалуроновая кислота, хондроитин-6-сульфат, хондроитин-4-сульфат, дерматансульфат, гепарансульфат, гепарин, кератинсульфат) и ферменты.

Прежде чем пересадки фибробластов стали реальностью, пришлось решить много методических вопросов и вопросов безопасности подобных процедур. Уставлено, что нормальные фибробласты в культуре сохраняют диплоидный кариотип, способны расти только в прикреплённом к поверхности культурального флакона состоянии, обладают феноменом контактного торможения и имеют ограниченную продолжительность жизни ("лимит Хейф-лика"). Кроме того, они не онкогенны и имеют низкую экспрессию антигенов гистосовме-стимости. В настоящее время можно выделить два основных подхода к лечению кожи с помощью препаратов, содержащих интактные живые фибробласты:
1. Создание методов и препаратов для лечения дефектов кожи раневого и ожогового характера с помощью культур аллогенных фибробластов.
2. Использование аутологичных фибробластов человека для заместительной клеточной терапии кожных покровов.
Научные исследования, направленные на изучение воздействия культуры фибробластов в лечении рубцовых дефектов кожи являются актуальными и перспективными. Цель исследования
Изучить изменения в рубцовой ткани кожного покрова под воздействием культуры ауто-и аллофибробластов в эксперименте.

 

Материал и методы исследования
Экспериментальный раздел работы выполнен на базе Центральной научно-исследовательской лаборатории СамГМУ. Изучение изменений в рубцовой ткани кожи под воздействием культуры фибробластов проводилось на 54-х лабораторных белых крысах, разделенных на 3 серии.
В первой серии (18 крыс) внутрикожным введением в область рубца трансплантировали культуру аутологичных фибробластов; во второй серии (18 крыс) - в область рубца вводилась культура аллогенных фибробластов; в третьей серии (18 крыс) - рубцы не лечились и служили контролем. Источником культивирования клеток для экспериментов служили небольшие биоптаты кожи с проксимальной части хвоста крыс. Трансплантация клеточной культуры проводилась 3-х кратно с интервалом 2 недели. Животные выводились из эксперимента на 7-й день после первого, второго, третьего введения клеточной культуры и через 2,4,8 недель после окончания лечения.

Результаты исследования
Визуально результаты лечения рубцов наиболее выражены в 1-й серии экспериментов (трансплантация аутофибробластов), что выражалось в уменьшении ширины рубца, выравнивании рельефа рубца на уровне кожи, цвет рубца приближался к цвету нормальной кожи. Во 2-й серии (трансплантация аллофибробластов) результаты были менее выражены, чем в 1-й серии, но лучше чем в контрольной серии без лечения. В контрольной серии рубец был более широким, нормо- атрофическим, цвет рубца значительно выделялся по сравнению со здоровой кожей.

Выводы
Применение культуры ауто- и аллофибробластов является эффективным методом местного лечения рубцовых дефектов кожи. Использование клеточных технологий является перспективным направлением в современном лечении нормо-атрофических рубцов различного генеза (рубцы постакне, линейные атрофии, эстетически неприемлемые постхирургические рубцы, морщины кожи).