Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам 70-й Юбилейной итоговой научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г. Томск, 16-18 мая 2011 г.), под ред. В. В. Новицкого, Л. М. Огородовой. − Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. − 430 с.

 

Скачать сборник (формат MS Word, 7,3 мб)

Посмотреть основную информацию о сборнике, обложку и т.д.

 

Актуальность: в последние 10-15 лет в связи с развитием клеточных технологий и пробудившимся в мире интересом к регенерационным свойствам стволовых клеток костного мозга, появилась возможность их легитимного применения у больных с тяжелой хронической патологией.. Рассмотрим это на модели длительно незаживающей язвы желудка (ДНЯЖ) у крыс. Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки – хронические заболевания, сопровождающиеся отчетливо выраженными нарушениями функционирования иммунной  системы с развитием вторичного иммунодефицита и торможением процессов восстановительной регенерации язвенных дефектов.

Цель: изучить влияние трансплантации культивированных мультипотентных МСКК костного мозга на восстановление морфофункционального состояния тимуса и селезенки, а также регенерацию в длительно незаживающих аутоиммунных язвах желудка.

Материал и методы: Опыты выполнены на 30 крысах-самцах линии Wistar массой тела 250-300 г, у которых моделировали аутоиммунные ДНЯЖ. Через 35-40 суток у крыс развивалась язва желудка диаметром до 5-7 мм с подрытыми неровными краями. Сформированные язвы оставались без тенденции к заживлению в течение 2.5 мес и более. Далее все экспериментальные животные были разделены на 2 группы. Животные первой группы получали трансплантацию аутогенных ММСК. Крысам 2 группы вводили физиологический раствор. Выделение клеток КМ проводили на 30-35 сутки после моделирования ДНЯЖ из бедренных костей. Культивирование клеток КМ проводили не только с целью наращивания клеточной массы, но и устранения дизрегуляторного влияния на них аутоиммунного процесса в организме. Через 45 суток от начала моделирования ДНЯЖ производили лапаротомию, гастротомию и в 1-й группе осуществляли введение ММСК в виде суспензии в количестве 4×106 клеток в 0.5 мл физиологического раствора путем обкалывания краев язвенного дефекта в 4 равноудаленные точки, а во 2-й группе – обкалывания язвенного дефекта 0.5 мл физиологическим раствором.

Контроль эффективности восстановления адекватных адаптационных реакций в организме под влиянием терапии культивированными ММСК КМ оценивали по динамике заживления язвенного дефекта и восстановления морфофункционального состояния тимуса и селезенки.

Результаты: исследования показали, что при трансплантации ММСК КМ животным с ДНЯЖ происходит активация морфофункционального состояния иммунной системы: в тимусе отмечается расширение коркового слоя и субкортикальной зоны; в селезенке увеличивается объемная доля лимфоидных фолликулов и ПАЛМ; снижается уровень провоспалительных и повышается уровень противовоспалительных цитокинов. Это приводит к стимуляции репаративных процессов и ускорению темпов заживления аутоиммунных ДНЯЖ. Уже на 10-е сутки после трансплантации ММСК происходит статистически значимое уменьшение площади язвенного дефекта по сравнению с контрольной группой, а  к 30-м суткам отмечается полное заживление. Такая позитивная динамика была связана с присутствием и продолжающимся функционированием ММСК в зоне язвенного дефекта. Подтверждением этого стало выявление ММСК КМ методом гистохимического окрашивания на в-галактозидазу, кодирующую предварительно введенный LacZ ген E. Coli.  После трансплантации ММСК КМ на протяжении всего срока наблюдения в глубине регенерирующей язвы выявляются трансплантированные клетки, которые сохраняют свою жизнеспособность и , следовательно, способность продуцировать факторы, ускоряющие восстановительные процессы. Культивированные ММСК КМ в условиях иммунопатологии деблокируют механизмы пролиферации мегакариоцитов, которые в свою очередь включаются в регуляцию гемопоэза и способствуют повышению продукции противовоспалительных цитокинов.

Выводы: трансплантация прекультивированных аутологичных клеток костного мозга - мононуклеарных клеток и мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в зону язвенного дефекта является эффективным методом лечения длительно незаживающих аутоиммунных язв желудка, так как ускоряет процесс восстановительной регенерации в зоне язвенного дефекта и корригирует иммунопатологические изменения в организме, ликвидируя тем самым условия для их возникновения.