Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Исследования последних лет показали, что свободнорадикальное окисление (СРО) играет ключевую роль в патогенезе многих заболеваний легких. Особое значение СРО имеет при хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ). Неконтролируемая генерация активных форм кислорода и их производных вызывает повреждение белков, нуклеиновых кислот, ферментов, биомембран и, в конечном итоге, приводит к развитию патологических состояний. Оксиданты не только повреждают белки, липиды, нуклеиновые кислоты, но также опосредуют множество процессов, благоприятствующих развитию ХОБЛ: повреждают фибробласты, снижают активность сурфактанта, повышают проницаемость эпителия, ухудшают функцию ресничек и т.д. В воспалительном процессе участвуют практически все клеточные элементы, а наибольшее значение придается фагоцитирующим клеткам (нейтрофилы, макрофаги, эозинофилы), которые обладают мощными специализированными системами генерации АФК. Одной из них является миелопероксидаззависимая продукция нейтрофилами и эозинофилами активных форм кислорода. К настоящему времени исследования миелопероксидазной активности лейкоцитов при ХОБЛ рассматривается с позиций биохимических и биофизических процессов. Отсутствуют сведения о непосредственной проекции миелопероксидазной активности на клинические характеристики болезни. Вместе с тем, сопоставление влияния на клиническое течение ХОБЛ миелопероксидазной активности нейтрофилов только бронхиального пространства может быть недостаточно информативным, так как в этом случае исследуются нейтрофилы преформированные факторами местного длительного воспаления, процессом миграции на поверхность слизистой оболочки. В связи с этим целесообразно оценить миелопероксидазную активность нейтрофилов в различных регионах организма и выяснить влияние этого фактора на клинические проявления ХОБЛ.
Цель ? установить связи между активностью миелопероксидазы нейтрофилов в очаге асептического воспаления, в крови и индуцированной мокроте с клинико-функциональными симптомами хронической обструктивной болезни легких.
Материал и методы. Клиническое обследование пациентов проводилось в соответствие с регламентом GOLD 2003. Тест с 6-минутной ходьбой дополнялся контролем сатурации кислорода до и после нагрузки. Очаг асептического воспаления создавался методом кожного окна по методике J. Rebuck, в модификации [1]. Миелопероксидаза (МП) в нейтрофилах определялась цитохимическим методом Грэхема — Кнолля с количественной оценкой результатов методом компьютерной морфометрии. Обследовано 68 пациентов мужского пола, средний возраст которых составлял 57,4 ± 8, 3 лет, с ХОБЛ ІІ – ?V стадии в период обострения. Обследование проводилось на 2-4-й и на 12?16 день поступления пациентов в пульмонологическое отделение. Статистическая обработка полученных результатов проводилась корреляционным анализом Спирмена. Значимость соответствующего статистического критерия принималась при р < 0,05.
Результаты и обсуждение. Исследования показали, что количество миелопероксидазы в нейтрофилах крови связано прямой корреляцией с частотой дыхания при поступлении (r=0,55 р=0,027), сатурацией кислорода в покое (r= +0,058; р=0,019). Пациенты с высоким содержанием МП в нейтрофилах крови исходно проходили меньший путь при пробе с 6 минутной ходьбой в случае высокого содержание МП в нейтрофилах крови (r=-0,48 р=0,046). Выявились обратные корреляции спирографических показателей, в частности ОФВ1 и индекса Тиффно, которые статистически значимо зависели от насыщения нейтрофилов крови миелопероксидазой (r=-0,62 р=0,004; r=-0,69 р=0,001), соответственно.
В нейтрофилах индуцированной мокроты обнаружено, что содержание миелопероксидазы прямо коррелирует с темпом сердечных сокращений (r=0,50 р=0,007), жизненной емкостью легких (r=-0,44 р=0,02).
Пациентам проводился тест «кожного окна», который является моделью позволяющей оценить «поведение» нейтрофилов в очаге воспаления. В отпечатках миелоперксидаза оценивалась количественно как внутри, так и вне клеток. Высокая продукция миелопероксидазы нейтрофилами при их активизации факторами воспаления оказалась связанной с характеристиками функции внешнего дыхания. Так высокому содержанию МП внутри нейтрофилов соответствовал меньший ОФВ1 (r=-0,51; р =0,01), меньший объем ЖЕЛ и ФЖЕЛ (r=-0,55; р=0,006; r=-0,59 р=0,003) как в начале обострения так и на завершающем этапе лечения (корреляции с ЖЕЛ составили r= -0,52; р=0,009). Сатурация кислорода до и после теста с 6 минутной ходьбой имела обратную зависимость от количества МП в нейтрофилах региона воспаления (r=-0,50; р=0,005; r=-0,57; р=0,001) – большему количеству МП в нейтрофилах соответствовала меньшая сатурация кислорода.
Получены данные в отношении корреляций между размерами нейтрофилов крови и некоторыми клиническими показателями, характеризующими тяжесть заболевания. Так высокий коэффициент прямой корреляции обнаружен между величиной нейтрофилов крови и расстоянием, проходимым пациентом при пробе с 6 минутной ходьбой и (r=+0,74; р=0,0006), исходной сатурацией кислорода (r=+0,53; р=0,03). То есть сниженной толерантности к физической нагрузке, меньшей сатурации кислородом крови соответствует меньшая величины нейтрофилов. Объяснение этому факту находим в следующем. Как известно при ХОБЛ выявляется повышенное количество нейтрофилов в бронхолегочном регионе. Аккумуляции клеток способствуют следующие причины. Оксиданты табачного дыма (вероятно совместно с другими факторами, возможно обусловленные генетической детерминированностью) вызывают полимеризацию актина нейтрофилов и снижают их деформируемость, уменьшает величину. Снижение деформируемости способствует «застреванию» нейтрофилов в капиллярах легких и их адгезии к эндотелию. Адгезия клеток сопровождается генерацией АФК. Гигантское скопление активированных нейтрофилов в капиллярной сети альвеол приводит к оксидативному стрессу, под действием которого происходит разрушение структурных элементов альвеол и формирование эмфиземы и фиброза [2]. В конечном итоге связь миелопероксидазной активности нейтрофилов с клиническими характеристиками ХОБЛ отражает влияние этого фактора на выраженность морфологических изменений в легких, следствием которых является нарушение функции внешнего дыхания и газообмена в легких, с последующей мобилизацией компенсаторных реакций и неизбежным снижением функциональных возможностей организма.
Выводы.
1. При хронической обструктивной болезни легких выявлены обратные корреляционные связи миелопероксидазной активности нейтрофилов крови и толерантностью к физической нагрузке в 6-ти минутном тесте с ходьбой, индексом Тиффно, ОФВ1, сатурацией кислорода и прямые корреляции с частотой дыхания; в нейтрофилах индуцированной мокроты – обратные корреляции с ЖЕЛ, прямые - темпом сердечных сокращений; в нейтрофилах очага асептического воспаления – обратные корреляции активности миелопероксидазы с ОФВ1, ЖЕЛ, ФЖЕЛ, сатурацией кислорода и толерантностью к физической нагрузке.
2. Обнаружена прямая корреляция между размером нейтрофилов и толерантностью к физической нагрузке, сатурацией кислорода: меньшей величине нейтрофилов соответствует сниженная толерантность к физической нагрузке и сатурация кислорода.
Список литературы:
1. Маянский, Д. Н., Урсов, И. Г. Лекции по клинической патологии: Рук-во для врачей / Новосиб. мед. ин-т. ? Новосибирск: Ин-т теплофизики, 1997. ? 249 с.