|
НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН, (г. Томск)
Эта работа опубликована в сборнике статей по материалам пятого конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» / Под ред. Л.М. Огородовой, Л.В. Капилевича.- Томск, СибГМУ.- 2004.- 413 с.
Скачать сборник целиком
Ангиотензин II (Asp - Arg - Val - Tyr - Ile - His - Pro - Phe), являясь многофункциональным пептидом, играет важную роль в патогенезе артериальной гипертонии, так как увеличивает периферическое сосудистое сопротивление и вызывает гипертрофию левого желудочка сердца при гипертонии. Количественное определение ангиотензина II является актуальным в оценке эффективности лечения заболеваний сердечно¬сосудистой системы. Известны различные способы количественного определения данного пептида, и в первую очередь это радиоиммунный и иммуноферментный методы, но им свойственна длительность и трудоёмкость процесса анализа [1]. Предлагаемый способ определения ангиотензина II основан на применении современного физико-химического метода анодной инверсионной вольтамперометрии, который обладает высокой чувствительностью, экспрессностью и простотой аппаратурного оформления [2]. В связи с этим, целью настоящей работы являлся выбор оптимальных условий электроокисления ангиотензина II на графитовом электроде и разработка методики его количественного определения. Объектом исследования служила субстанция ангиотензина II фирмы Sigma (Германия). Разработку методики определения концентрации ангиотензина II на основе инверсионной вольтамперометриии проводили на приборе ТА - 2 (ООО НПП "Техноаналит" г. Томск). В двухэлектродной ячейке индикаторным служил графитовый электрод. В качестве электрода сравнения использовали хлоридсеребряный. Деаэрирование и перемешивание анализируемых растворов с целью удаления следов кислорода осуществляли азотом с содержанием кислорода менее 0,001%.
В процессе поиска оптимальных условий инверсионного вольтамперометрического определения ангиотензина II было изучено влияние ряда факторов (индикаторный электрод, фоновый электролит, время и потенциал электролиза) на высоту аналитического сигнала. В предлагаемом способе в качестве индикаторного электрода использовали графитовый, который был выбран нами из-за хорошей воспроизводимости аналитического сигнала и низкого значения остаточного тока, что повышало разрешающую способность метода. Исходя из полученных результатов, в качестве фонового электролита использовали раствор аммония гидрофосфата двузамещённого, так как данные условия обеспечивали хорошую электропроводность, широкую рабочую область и необходимую площадь для обработки сигнала. Оптимальное время предварительного электролиза составило 330 с, при этом достигались максимальное значение величины тока растворения накопленных осадков с поверхности графитового электрода и хорошая воспроизводимость для количественного определения исследуемого вещества, изменение данного параметра приводило к искажению сигнала и снижению чувствительности определения пептида. Оптимальный потенциал электролиза составил (¬1,5) В. При значениях потенциала электролиза менее (-1,5) В величина регистрируемого анодного тока значительно уменьшалась, что снижало чувствительность определения, а при значениях потенциала электролиза более (-1,5) В происходило частичное накопление осадка. Относительная погрешность методики составила 4,65 %. Экспериментально установленные условия определения ангиотензина II методом инверсионной вольтамперометрии, позволили с высокой чувствительностью и экспрессностью анализировать указанный пептид в водной и биологической средах, а так же разработать методику определения содержания микроколичеств ангиотензина II в плазме и сыворотке крови.
Литература:
1. Таранов А.Г. Диагностические тест-системы (радиоиммунный и иммуноферментный методы диагностики) / А.Г. Таранов. - М.: Издатель Мокеев, 2002. - 288 с.
2. Захарова Э.А. Инверсионная вольтамперометрия / Э.А. Захарова, Н.П. Пикула, Н.М. Мордвинова. - Томск: Изд. ТПУ, 1999. - 56 с.
|