Авторы:

Нишонова А.А., Юлдашев А.Ю., Рахматова М.Х., Исламова Г.Р.

 

Ферганский филиал Ташкентской медицинской академии. (г. Фергана)

Постнатальное развитие и становление органов пищеварительной системы (желудок, тонкая и толстая кишка, печень, поджелудочная железа) являются продолжением внутриутробного и составной частью единого процесса системогенеза, формирования функциональной системы пищеварения, всасывания, гомеостаза [Воронцов И.М., Мазурин А.В.  1980, Зуфаров К.А., Юлдашев А.Ю. 2001.]
На  белых беспородных крысах в возрасте 1,3,7,14,21 и 90 дней после рождения (п=40), морфологически изучены слизистая оболочка фундальной части желудка. Светооптические исследования проведены после фиксации в смеси Карнуа, 12% нейтральном формалине. После проводки и заливки в парафин  срезы толщиной 5-6 мкм окрашены гематоксилин – эозином, на РНК – пиронином – светлым зеленым по Браше, ШИК-реакцией. Для электрономикроскопических исследований кусочки слизистой оболочки желудка  фиксировали в забуференном 2,5% растворе глют-аральдегида (20 мин),  в 1% растворе OsO4 (1,5 часа). После обезвоживания в спиртах возрастающей концентрации кусочки заливали в аралдит по общепринятой методике. Ультратонкие срезы, полученные на ультратоме LKB-4800, после контрастирования просматривали с помощью электронного микроскопа  JEM- 100S.
    На светооптически ориентированных срезах с помощью окуляр микрометра МБИ- 15х измерены в мкм глубина желудочных ямок и длина железистых трубок. Их отношение  (железисто-ямочный индекс, ЖЯМИ)  характеризует степень становления структур слизистой оболочки фундальной части желудка. Кроме того, на срезах, окрашенных по Самсонову, определены число покровных, главных, париетальных, шеечных и добавочных клеток. Подсчет митотически  делящихся эпителиальных клеток производили при просмотре продольно ориентированных железистых трубок среди 3-10000 клеток и выражали в %.
    Результаты количественных исследований обработаны с помощью пакета программ на компьютере Pentium – IY. Значения достоверны Р <0,05.
Результаты и обсуждение. При рождении крыс стенка желудка тонка: в ней из-за отсутствия сплошной мышечной пластинки  слизистая и подслизистая оболочки не отделены между собой.  Слизистая оболочка и ямки фундальной части желудка  выстланы призматическим эпителием. Короткие относительно редкие железистые трубки начинаются от дна железистых ямок, почти не имеют просвета и  образованы низкопризматическим эпителием.
    Цитоплазма покровных и ямочных клеток в апикальной части окрашена оксифильно и ШИК- положительно. Среди  эпителия образующихся фундальных желез относительно высок уровень митотически делящихся эпителиальных клеток: его индекс составляет 12,11±1,3%. (таблица 1).

 

Таблица 1

Динамика глубины желудочных ямок и длины железистых трубок, железисто- ямочный индекс (ЖЯМИ) фундального отдела желудка крыс в постнатальном периоде жизни (М±м, мкм; п=8)

Возраст, дни после рождения	Глубина ямок	Длина железистых трубок	ЖЯМИ (отношение глубины ямок к длине желез)
1 3 7 14 21 90	41,5±1,5 41,0±1,3 45,0±1,3 66,0±1,4 70,0±1,5 93,0±2,0	105±1,9 131±1,9 170±1,4 244±2,7 275±3,0 464±5,1	2,53 3,18 3,78 3,70 3,93 4,99

  Клетки, выстилающие их, в основном низкопризматические, содержат относительно крупное базально расположенное неправильной формы ядро. Узкий ободок цитоплазмы богат свободными рибосомами, полисомами. Профили гранулярного и гладкого эндоплазматического ретикулума короткие, уплощенные, комплекс Гольджи расположен вблизи ядра и состоит из мелких везикул и единичных коротких уплощенных цистерн. Митохондрии округлые, овальные, мелкие, немногочисленны. На свободной поверхности этих малодифференцированных клеток имеются короткие микроворсинки.
    Таким образом, при рождении у крыс в слизистой оболочке среди эпителиальных клеток имеются признаки дифференцировки покровных, ямочных  и добавочных клеток, высок митотический индекс среди клеток ямочного и железистого эпителия. Фундальные железы короткие, редкие. Соединительная ткань между ними не дифференцирована, состоит из бластных клеток и редко расположенных сосудов.
       Увеличение день ото дня секретируемого молока вызывает увеличение его объема  в желудке. На третьи сутки слизистая оболочка утолщается, ее складки распрямляются.
Желудочные ямки неглубокие, выстланы покровными клетками. В собственной пластинке параллельно друг другу располагаются трубчатые железы. Если в каждой железистой трубке насчитывается 20,9 ± 0,47 клеток, то из них париетальные, шеечные и дифференцирующиеся клетки составляют в среднем 24,3, 23,9 и 51,8% (таблица 1,2). В этот срок жизни крыс среди железистых клеток впервые появляются клетки  с признаками дифференцировки главной, различимой только при электронной микроскопии. В их цитоплазме под ядром и сбоку различаются параллельно расположенные профили гранулярного эндоплазматического ретикулума. Над верхним полюсом ядра увеличиваются везикулы, вакуоли и цистерны комплекса Гольджи, митохондрии выявляются повсеместно. Однако в цитоплазме признаков синтеза и образования секреторных гранул не обнаружено. В этот срок исследования митотически делящиеся клетки могут встречаться среди ямочного эпителия и вдоль железистой трубки, но постепенно они концентрируются в области верхней части железистых трубок, под дном ямок.    Глубина ямок составляет 41,0 ± 1,3 мкм, желез- 130,7± 1,9 мкм; железисто-ямочный индекс (ЖЯМИ) равен в среднем 3,7.
На 7 сутки после рождения крыс слизистая оболочка утолщается в среднем на 12,6%  за счет преимущественного удлинения фундальных желез: глубина желудочных ямок составляет 45,0± 1,3 и фундальных желез 170± 1,4 мкм., ЖЯМИ составляет 3,78  (таблица 1, 2).                                          

                                                                                                                    

                                                                                                                        Таблица 2

Динамика количества покровно-ямочных, железистых клеток и железисто-ямочный клеточный индекс (ЖЯКИ) в фундальной части желудка крыс в постнатальном периоде жизни (М±м, мкм; п=8)

Возраст дни	Покровно-ямочные	Количество клеток в железе	Шеечные	Добавоч-ные	Главные	Парие-тальные	ЖЯКИ
1   3   7   14   21   90	11,55±0,31   10,15±0,40   12,60±0,35   13,5±0,25   16,0±0,30   28,61±0,40	19,80±0,41 100% 20,85±0,56 100% 30,65±0,67 100% 36,52±0,80 100% 44,80±1,3 100% 95,30±1,5 100%	-   4,85±0,20 23,26% 6,15±0,30 20,01% 5,18±0,20 14,18% 5,20±0,15 11,61% 6,15±0,24 6,45%	-   11,40±0,2 54,68% 8,40±0,18 27,41% 7,95±0,19 21,77% 8,50±0,25 18,97% 18,60±0,2 19,52%	-   -   8,90±0,11 29,03% 12,80±0,15 35,05% 20,30±0,35 45,31% 53,20±0,70 55,82%	-   3,80±0,15 18,23% 7,20±0,35 23,49% 10,59±0,40 29,0% 10,80±0,60 24,11% 17,35±0,45 18,21%	1,71   2,05   2,43   2,71   2,80   3,33

Примечание: количество клеток в железе условно принято за 100%; железисто-ямочный клеточный индекс – это отношение среднего числа клеток в фундальной  железе к числу клеток в ямке.

Секреторные гранулы умеренной электронной плотности, постепенно накапливаются под апикальной плазмолеммой. Липидные капли в покровных клетках различны по числу, размерам, округлые, располагаются беспорядочно.
В железистых трубках, где число эпителиальных клеток увеличивается до 31,6±0,6,  шеечные, добавочные, главные и париетальные составляют соответственно 6,15±0,30 (20,01%), 8,40±0,20 (27,4%), 8,90±0,21 (29,03%), 7,20±0,15 (23,49%).
Париетальные клетки также более дифференцированы: возрастают внутри и межклеточные секреторные канальцы с просветом и микроворсинками. Цитоплазма содержит значительно больше гладкостенных мелких везикул, округлых митохондрий с плотным матриксом и многочисленными кристами. Профили шероховатого эндоплазматического ретикулума и комплекс Гольджи почти не развиты. Свободные рибосомы и полисомы малочисленны. Митотически делящиеся эпителиальные клетки постепенно смещаются на дно желудочных ямок и верхнюю треть железистых трубок. Одновременно их доля уменьшается: в области шейки железы он становится равен 16,8±0,80 против 25,1±1,8% через 3 суток после рождения крыс (Р <0,001).
    2 недели после рождения рассматриваются как критический период: с этого возраста в течение 7 дней крысы находятся на смешанном питании. К этому возрасту слизистая оболочка фундальной части желудка утолщается до 310 мкм в среднем: ямка – на 146%, железа – на 143% в среднем.
    Железы имеют отчетливо различимые зоны расположения шеечных, главных и париетальных клеток, хотя пролиферирующие клетки окончательно еще не сосредоточены в шеечной области. По ультраструктуре главные, париетальные клетки все больше приближаются к таковым у половозрелых животных. В главных клетках вокруг ядра, расположенного базально, резко возрастают профили шероховатого эндоплазматического ретикулума, в цистернах которого наблюдаются синтезируемые секреторные гранулы.
    С 21 дня после рождения крысы переходят на дефинитивное питание. Структура слизистой оболочки фундальной части желудка, специализированных ее клеток становятся почти идентичной таковой 90- дневных взрослых крыс. Зоны расположения пролиферирующих (шеечных), главных и париетальных клеток у них почти идентична, хотя доля меняется в соответствии с возрастом. Париетальные клетки располагаются ниже зоны шеечных и добавочных клеток, характеризуются хорошо развитыми внутриклеточными секреторными канальцами с длинными микроворсинками в просвете. В цитоплазме много митохондрий гладкостенных везикул и вакуолей, особенно вокруг секреторных канальцев. Главные клетки в основном сосредоточены в области дна фундальных желез. Между кормлениями в апикальной цитоплазме содержатся многочисленные зрелые секреторные гранулы. В цистернах базально расположенных мембран шероховатого эндоплазматического ретикулума  обнаруживается синтезируемый секреторный продукт. В цистернах и вакуолях комплекса Гольджи много созревающих гранул, имеющих умеренную плотность. Митохондрии часто находятся в контакте с профилями шероховатого эндоплазматического ретикулума.Железисто-ямочный индекс становится равен 3,93.
    Таким образом, в течение 3 недель после рождения у крыс осуществляется развитие и становление структурно- функциональной единицы фундальной части желудка – желез и ямок, дифференцировка железистых клеток.    У 21-дневных и взрослых 3- месячных крыс покровные, шеечные, добавочные, париетальные и главные клетки  по структуре  почти идентичны. Отличия касаются, как видно из таблиц 1 и 2 толщины слизистой оболочки, их соотношения, железисто- ямочного и железисто- ямочного клеточного индексов.

 

    Выводы.

1. При рождении крыс  в слизистой оболочке фундальной части желудка различаются ямки, формирующиеся железы, которые состоят из малодифференцированных, дифференцирующихся париетальных и добавочных клеток; первые признаки дифференцировки главных клеток отмечаются с 3 дня жизни.
2.    Переход от грудного вскармливания к смешанному и дефинитивному питанию завершается топографическим становлением зон локализации специализированных клеток в фундальных железах; снижением митотической активности в зоне локализации шеечных (камбиальных) клеток.
3.    В постнатальном периоде в различные сроки жизни возникновение, дифференцировка специализированных клеток, установление определенных взаимоотношений между ними в отдельных фундальных железах отражает их адаптацию и интеграцию при формировании функциональной системы пищеварения, всасывания и гомеостаза.