Введение

     Corbicula japonica Prime  -  двустворчатый моллюск, обитатель низовий и эстуариев рек, солоноватоводных озер и лагун. Его ареал охватывает континентальное побережье Японского моря к югу от устья реки Амур, юг Сахалина и Курильских островов, Японию (о-ва Хоккайдо, Хонсю, Сикоку, Кюсю), а также Корейский полуостров (Щукина, Полупанов, 2002).

      Корбикула японская  является доминирующим по биомассе видом в донной фауне солоноватоводных озер Сахалина и используется в пищу  местным  населением (Ключарева с соавт., 1964; Мандрыка, 1981). В Японии этот съедобный моллюск пользуется большой популярностью  (Arita et al., 2001).

        Присутствие токсигенных грибов в моллюсках представляет реальный риск отравления при употреблении зараженных продуктов, как показывают микологические исследования мускула Mytilus eduliset al., 2000).  Несмотря на это, работы по изучению микобиоты промысловых моллюсков сейчас только начинаются. (Sallenave-Namont

Материалы и методы

                Моллюски были собраны в озере Айнское (о-в Сахалин) 25 сентября 2000 года. Озеро Айнское относится к группе лагунных озер морских побережий, обязанных своим происхождением смещению береговой линии и обособлению заливов и бухт в результате намыва песчаных кос. Они еще сохраняют частичную связь с морем через протоки и имеют солоноватую воду. Расположено озеро Айнское на западном побережье Сахалина  в 1 км от морского берега. Его общая площадь 33.3 кв. км, длина 13.2 км, средняя ширина – 2.4 км (Григорьев, 1964).

          Были отобраны половозрелые особи с шириной раковины 25-35 мм. В течение суток моллюски содержались в проточной воде с целью освобождения  внутренних органов от песка и ила. Затем материал заморозили и хранили в морозильной камере при температуре –18 Сo. В эксперименте использовали 40 моллюсков. Отпрепарированные внутренние органы: жабры, мантия, почки, пищеварительная железа, мускул, женские и мужские гонады в течение двух часов вымачивали  в растворе антибиотиков (пенициллина и стрептомицина в концентрации 500 тыс.ед./л и 0.5 г/л) для подавления сопутствующей бактериальной микрофлоры, затем промывали в  стерильной воде. Использовали четыре питательные среды: глюкозо-дрожжевую (глюкоза 10 г/л, дрожжевой экстракт 0.4 г/л ), сусло-агаровую      ( 15 г/л ), среду Чапека (готовая смесь 25 г/л) и среду Тубаки (глюкоза 30 г/л, пептон 1.0 г/л, дрожжевой экстракт 0.5 г/л, MgSO4 0.24 г/л, FeSO4 х 7H2O 0.01 г/л, K2HPO4  1.0 г/л,  морская вода 100 мл, дистиллированная вода 900 мл).

     Засеянные среды инкубировали при температуре 26oС. Выросшие на жидких питательных средах колонии пересевали на агаризованные среды  аналогичного состава и идентифицировали.

Результаты

       В результате микологического обследования двустворчатого моллюска корбикулы японской обнаружено 10 видов мицелиальных грибов: Mortierella longicollis Dixon-Stewart, Mortierella vinaceae Dixon-Stewart,  Mortierella sp., Mucor circinelloides v. Tiegh. (Zygomycota), Aspergillus ochraceum Wilhelm,  Penicillium atramentosumTrichoderma aureoviride Rifai, Trichoderma hamatum Bainier, Trichoderma sp., Cladosporium sphaerospermum    (Deuteromycota). Thom, Penz.

Наибольшее количество видов было обнаружено на глюкозо-дрожжевой среде (8 видов), на среде Тубаки (3 вида),  на сусло-агаре (2 вида), на среде Чапека (1 вид). В таблице представлено распределение выделенных грибов на питательных средах.

Таблица. Мицелиальные грибы, выделенные из органов моллюска на различных средах

Грибы обнаружены в мантии - Trichoderma aureoviride,  Mortierella vinaceae, Aspergillus ochraceum, Mortierella sp., в почках - Cladosporium sphaerospermum, Trichoderma sp.,  в пищеварительной железе  - Mortierella longicollis, Penicillium atramentosum, Trichoderma hamatum, в мужских гонадах  - Trichoderma aureoviride, в женских гонадах -Mucor circinelloides. В жабрах и мускуле грибы не обнаружены. Отмечен рост дрожжевых грибов.

Обсуждение

          В настоящее время существует очень мало данных о морских грибах, обитающих на животных субстратах (Kohlmeyer, Kohlmeyer, 1979).  К.Д. Хайд с соавторами описывает болезнь моллюсков и ракообразных, вызываемую грибом из рода Fusarium (Hyde et al., 1998). Представитель этого же рода   Fusarium solani вызывает инфекционное заболевание у взрослых особей и молоди креветок, что ведет к их массовой гибели и  значительному ущербу в хозяйствах марикультуры (Sindermann, Lightner, 1988).   Широко известны  афлатоксикозы – заболевания,  вызываемые несовершенными грибами  Aspergillus flavus и Aspergillus parasiticus,  которые поражают не только людей и животных, но и креветок, вызывая у последних некроз пищеварительной железы (Sindermann, Lightner, 1988).  При исследовании эпизоотий у коралла Gorgonia ventalina был выделен гриб Aspergillus sydowii (Slattery, 1999). Есть сообщения о массовых случаях   хитинолитической болезни крабов - стригунов, вызываемой сумчатым грибом  Trichomaris invadens (Стексов, 2002).  Изучена микобиота  голотурий Apostichopus japonicus, Eupentacta fraudatrix, Cucumaria japonica , выделенных из Японского моря у побережья Приморья (Pivkin, 2000).

     Исследуя микобиоту мускула съедобного двустворчатого моллюска  Mytilus edulis французские ученые обнаружили мицелиальные грибы, принадлежащих к родам Penicillium, Trichoderma, Cladosporium, Aspergillus, которые обладали выраженной токсичностью (Sallenave-Namont et al., 2000). Наши результаты согласуются с данными по Mytilus edulis по составу мицелиальных грибов. В этой работе токсические свойства грибов, а так же их способность вызывать болезни у моллюсков не рассматривались, поскольку это является целью дальнейших исследований.

Литература

     Григорьев В.И. Гидрологический очерк некоторых озер Южного Сахалина. Озера Южного Сахалина и их ихтиофауна. Москва: Изд-во МГУ. 1964. С. 8 – 46.

     Ключарева О.А., Коренева Т.А., Сокольская Н.Л., Старобогатов Я.И. Донные беспозвоночные озер Южного Сахалина. Озера Южного Сахалина и их ихтиофауна. Изд-во МГУ. 1964. С. 47 - 81.

     Мандрыка О.Н. Исследование популяции двустворчатого моллюска Corbicula japonica Prime из солоноватых озер побережья Японского моря. Вестник Ленинградского университета.1981.  №15. Вып. 3. С. 18 – 25.

      Стексов В.В. Эпизоотические предпосылки марикультуры крабов Сахалина. Прибрежное рыболовство-XXI век. Материалы международной научно-практической конференции 19-21 сентября 2001. Южно-Сахалинск 2002. Труды СахНИРО. Т. 3. Ч. 1. С. 110 – 111.

     Щукина Г.Ф., Полупанов П.В. Некоторые аспекты экологии японской корбикулы (Corbicula japonica Prime), обитающей в озере Айнское. Прибрежное рыболовство-XXI век. Материалы международной научно-практической конференции 19-21 сентября 2001. Южно-Сахалинск 2002.Труды СахНИРО.  Т. 3. Ч.1. С. 128 -140.

     Arita J., Takemura K., Nagashima Y., Shiomi K. Purification and properties of a proteinaceous toxin from the brackishwater clam (Corbicula japonica). Toxicon.  2001. V. 39. P. 1061-1067.

     Hyde K.D., Jones E.B., Leano E., Pointing S.B., Poonyth A.D., Vrijmoed L.L. Role of fungi in marine ecosystems. Biodiversity  and Conservation.  1998. V. 7. P.1147-1161.

     Kohlmeyer J., Kohlmeyer E. Marine mycology: the higher fungi. New York: Academic Press, 1979. 704 pp.

      Pivkin M. V. Filamentous Fungi Associeted with Holothurians from the Sea of Japan, off the Primorye Coast  of Russia.// Biol. Bull. 2000. V. 198.  P. 101-109.

      Sallenave-Namont C., Pouchus Y.F., Robiou du Pont T., Lassus P., Verbist J.F. Toxigenic saprophytic fungi in marine shellfish farming areas. Mycopathologia.  2000. V. 149.  P. 21-25.

     Sindermann C.J., Lightner D.V. Disease diagnosis and control in North American marine aquaculture. Elsevier Science Publishers. 1988. 431 pp.

     Slattery M. Fungal pathogenesis of the sea fan Gorgonia ventalina: direct and indirect consequences. Chemoecology. 1999. V. 9. P. 97-104.