Гонорея - одна из основных инфекций, передающихся половым путем, которая разрушительно влияет на здоровье населения и является причиной стерильности супружеских пар примерно в 25% случаев. Заболеваемость гонореей в г. Перми в 2002 г. составила 30,7%о и проявляет тенденцию к росту.
Современная лабораторная диагностика этого заболевания основана на использовании микроскопического и культурального метода. Зачастую применение этих методов затруднено вследствие полиморфизма возбудителя, его требовательности к питательным средам и несовершенства этапа идентификации. Поэтому, существенно важно, использование методик, которые могут оказать помощь в изучении и характеристике микроорганизма и в ускорении диагностики гонореи. В настоящее время для диагностики целого ряда бактериальных инфекций успешно используется реакция коагглютинации, предложенная в 1973 г. G. Kronvall [1] и позволяющая выявить антигены возбудителя в раннем периоде заболевания. При гонорее клиническая оценка значимости этой реакции не проводилась.
В связи с этим целью нашего исследования явилось использование варианта реакции коагглютинации при подтверждении диагноза этого заболевания.
Материалом для исследования служило отделяемое уретры, полученное от 61 пациента городского кожно-венерологического диспансера города Перми, со стёртой, атипичной. формой гонореи. Для подтверждения диагноза заболевания использованы параллельно традиционные микроскопический и культуральный методы, а также вариант реакции коагглютинации, который был разработан в НПО "БИОМЕД", г. Пермь (Сперанская В.Н.).
На первом этапе исследования мы сочли целесообразным испытать реакцию не с патологическим материалом, а с предварительно выделенной чистой культурой гонококка. Для ускорения процесса выращивания микроорганизмов использовали специальную питательную среду - агар Мартена, с добавлением комплекса аминокислот и сывороточного белка. В ходе постановки реакции свежевыделенную 48-часовую культуру микроорганизма при помощи бактериологической петли смешивали с 15 мкл диагностикума на предметном стекле. Диагностикум представляет собой стафилококки штамма Cowan I, на поверхности которых адсорбированы специфические антитела к антигенам гонококка. Адсорбция связана со сродством белка А наружной мембраны стафилококка к Fc фрагментам иммуноглобулинов и обеспечивает свободную ориентацию Fab фрагментов молекул иммуноглобулинов. Эти фрагменты формируют активные центры антител и участвуют во взаимодействии с антигенами. Подобный тип адсорбции повышает специфичность реакции [2].
Постановка реакция сопровождалась заведомо положительным контролем с тесткультурой, контролем специфичности со стафилококком штамма Cowan I, не нагруженных гонококковыми антителами и контролем на исключение спонтанной агглютинации. Инкубацию проводим в течение 48 часов при температуре +37 град., оценку результатов проводим под микроскопом (X40). Наличие хлопьев агглютината расценивалось как положительный результат.
В ходе нашего исследования гонококки у пациентов были выявлены микроскопическим методом в 8,9% , а бактериологическим в 74,63% случаев. Высокий процент выявления следует объяснить тщательным клиническим подбором больных с соответствующей клиникой.
При постановке реакции коагглютинации положительные результаты были получены в 78,69%,а отрицательные в 21,31% случаев. Количество положительных результатов было достоверно большим (р<0,05). Чувствительность традиционного бактериологического метода и испытанной нами реакции коагглютинации примерно равна. Однако, бактериологический метод длителен в исполнении и связан с определёнными трудностями при окончательной идентификации. Реакция коагглютинации при наименьших затратах сил и средств позволяет подтвердить диагноз в более короткие сроки.
Таким образом, проведённые исследования показали простоту и доступность испытанного метода, по сравнению с традиционными методиками. Постановка реакции занимает не более 30 минут и не требует специального оборудования. Следует отметить высокую чувствительность и специфичность реакции, которые позволяют рекомендовать её в качестве дополнительного метода диагностики гонореи.